快捷

二氢黄酮苷又名橙皮苷、相溶柚皮苷，解度究环是法研一种黄酮类衍生物，其具有维持血管正常渗透压、糊精黄酮抗氧化、对氢降血脂、增溶作用抗炎、相溶抗癌抗肿瘤等生理功效，解度究环在功能性食品、法研化妆品及医药等领域具有巨大的糊精黄酮应用价值；但是二氢黄酮苷难溶于水，这极大地限制了其应用范围。对氢环糊精分子呈现出中空的增溶作用锥形环状结构，具有外亲水内疏水的相溶优良特性，这主要归因于环糊精分子外部含有较多的解度究环极性羟基和内部分子内腔由于C-H键屏蔽而呈现出的疏水性。环糊精在食品领域有着广泛地应用，法研其可以作为主体分子包合疏水性客体分子，形成稳态结构，从而提高客体分子的溶解度和稳定性等理化性质，起到保护、稳定药物分子的作用。为了改善二氢黄酮苷的溶解性，提高其稳定性及活性效率，扩大二氢黄酮苷功效成分的使用范围，制备不同用途的二氢黄酮苷功能性食品及药品，本文采用相溶解度法研究了常用环糊精对二氢黄酮营的包合作用、增溶作用以及包合过程有关热力学参数的变化，为二氢黄酮苷的开发利用及微胶囊化奠定基础。

一、材料与方法

1、材料与试剂

二氢黄酮苷、α-环糊精(α-CD)、β-环糊精(β-CD)、)，γ-环糊精(γ-CD)、甲基-β-环糊精(M-β-CD)、2-羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)、麦芽糖基-β-环糊精(Mal-β-CD)，上海阿拉丁生化科技股份有限公司；羟乙基-β-环糊精(HE-β-CD)，上海源叶生物科技有限公司；甲醇，西陇科学股份有限公司，分析纯。

2、仪器与设备

AL204电子分析天平：梅特勒一托利多仪器(上海)有限公司；UV-2600PC紫外/可见光分光亮度计：岛津企业管理(中国)有限公司；QYC一200全温培养摇床：上海新苗医疗器械制造有限公司。

3、实验方法

（1）标准曲线的绘制

以甲醇做溶剂，配制浓度为100mg/L的二氢黄酮苷溶液作为储备液，置于棕色试剂瓶中低温下保存。分别吸取二氢黄酮苷储备液0.4、0.6、0.8、1.0、2.0、3.0、5.0mL于7个10mL的比色管中，用甲醇定容至刻度，配制浓度为4～50mg/L的溶液。在波长284am处测定紫外吸光度，绘制标准曲线。

（2）不同环糊精浓度下的二氢黄酮苷的增溶试验

用蒸馏水做溶剂，分别配制浓度0、2、4、6、8mmol/L的7种环糊精溶液各5mL，加入过量的二氢黄酮苷于上述溶液中，分别在30℃、40℃、50℃避光条件下置于摇床中振摇48h，设置转动速度为200r/min，二氢黄酮苷溶解达平衡后，用孔径为0.45μm的针筒过滤器过滤，将滤液稀释一定倍数后测定284nm处的紫外吸光度，通过二氢黄酮苷的标准曲线得出二氢黄酮苷的含量。

二、结果与分析

1、二氢黄酮苷的标准曲线

按以甲醇做溶剂，配制浓度为100mg/L的二氢黄酮苷溶液作为储备液，置于棕色试剂瓶中低温下保存。分别吸取二氢黄酮苷储备液0.4、0.6、0.8、1.0、2.0、3.0、5.0mL于7个10mL的比色管中，用甲醇定容至刻度，配制浓度为4～50mg/L的溶液。在波长284am处测定紫外吸光度，绘制二氢黄酮营的标准曲线如图1所示，由图1可知，该标准曲线的回归方程：y=0.0322x+0.0425，R²=0.9994；由此可推断出在4～50mg/L浓度范围内，二氢黄酮苷的浓度与吸光度具有良好的线性关系。

2、相溶解度曲线

按用蒸馏水做溶剂，分别配制浓度0、2、4、6、8mmol/L的7种环糊精溶液各5mL，加入过量的二氢黄酮苷于上述溶液中，分别在30℃、40℃、50℃避光条件下置于摇床中振摇48h，设置转动速度为200r/min，二氢黄酮苷溶解达平衡后，用孔径为0.45μm的针筒过滤器过滤，将滤液稀释一定倍数后测定284nm处的紫外吸光度，通过二氢黄酮苷的标准曲线得出二氢黄酮苷的含量。计算不同温度下不同浓度环糊精溶液中的二氢黄酮苷含量，通过二氢黄酮苷与环糊精浓度的对应关系，选择合适的横纵坐标，绘制不同温度下的相溶解度曲线，结果如图2～4所示。当不添加环糊精时，二氢黄酮苷在水中的溶解度很小。在30℃、40℃、50℃条件下二氢黄酮苷的溶解度均随环糊精及其衍生物的浓度的增加而增加，这表明不同温度下环糊精及其衍生物均增加了二氢黄酮苷在水中的溶解度，且增溶作用明显。由图2～4可知，甲基-β-糊精增溶效果最显著，α-环糊精对二氢黄酮苷的溶解度影响很小，几乎不起增溶效果；γ-环糊精、β-环糊精及其衍生物浓度与二氢黄酮苷溶解度之间呈现线性相关，说明二氢黄酮苷与这6种环糊精1:1进行包合。

3、环糊精/二氢黄酮苷包合常数的测定

包合常数K是主客体相互作用中的重要参数，与包合物性质密切相关，通过其数值可以判断环糊精与难溶性物质包合时相互作用力的大小，因此包合常数的测定在表征包合物性质时具有十分重要的意义。通过AL型相溶解度图得到的线性方程，结合K=斜率/[So×(1-斜率)](So：二氢黄酮苷在水中的固有溶解度)，可以计算出K值，结果见表1。

根据二氢黄酮苷在不同浓度下的包合常数K，结合方程：

可计算出热力学参数△G。由方程式(1)和式(2)可得:

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